El segundo personaje importante de la historia de Guadalupe es el obispo Fray Juan de Zumárraga. Como muestra su apellido, no es originario de Extremadura sino que procede de la región vascongada. Se trata del primer obispo nombrado para Nueva España. La sede arzobispal estaba instalada en el centro de la ciudad de México. Pertenecía a la orden franciscana que, en aquellos tiempos había dado a la Iglesia los principales argumentos teológicos para definir entonces la doctrina de la Inmaculada Concepción como doctrina segura. Su orden religiosa era la que más defendía la proclamación de este Dogma mariano.  La imagen de la Virgen en la tilma será una Inmaculada. Al igual que en el caso de Juan Diego, su fisonomía queda plasmada en los ojos de la Virgen en la tilma.

      Su actitud, ante la narración de Juan Diego es de incredulidad vestida de prudencia. Y el gobernante Obispo muchísimas cosas le preguntó, le investigó, para poder cerciorarse, dónde le había visto, cómo era Ella (...) Y aunque todo absolutamente se lo declaró, dijo que no sólo por su palabra, su petición se haría, se realizaría lo que él pedía[1]. En consecuencia toma dos decisiones: A Juan Diego le pide una señal de la Virgen y, simultáneamente sin que él lo sepa, les manda a algunos de los de su casa en los que tenía absoluta confianza, que lo vinieran siguiendo, que bien lo observaran a dónde iba, a quién veía, con quién hablaba[2]. Las dos cosas solo servirán para certificar la veracidad de la aparición.